ELISA試劑盒從免疫原性及不亂性等方面臨5種抗原進(jìn)行對(duì)比,*挑選活化酯法組成的BSA-SM/b作為免疫抗原,經(jīng)過雜交瘤技能取得1株能不亂排泄抗鏈霉素特異性單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞株5C10。經(jīng)過試驗(yàn)對(duì)比了5種樣品處理辦法,ELISA試劑盒挑選用Careez法處理并4倍稀釋后用于測(cè)定。為探究一種可以迅速有用的檢查牛奶中鏈霉素殘留的辦法,本研討選用單克隆抗體技能等技能,合工抗原,制備出抗鏈霉素單克隆抗體,樹立了檢查牛奶中SM殘留的ELISA測(cè)定法,組建成鏈霉素迅速檢查ELISA試劑盒并進(jìn)行了優(yōu)化和實(shí)際應(yīng)用。
ELISA試劑盒作為一種靈敏、迅速、特異性強(qiáng)的辦法,酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法正逐漸應(yīng)用于藥物的殘留檢查,海內(nèi)外現(xiàn)已樹立了多種檢查牛奶中鏈霉素留的理化檢查辦法,當(dāng)然有些辦法對(duì)比靈敏、準(zhǔn)確,但由于辦法雜亂、耗時(shí)長、花費(fèi)大、技能請(qǐng)求原因此不適合大批量樣品的挑選。制備的腹水效價(jià)為1∶1280000,蛋白濃度為26.2mg/ml,與其他抗菌藥物的穿插反響率均低于0.1%。標(biāo)準(zhǔn)曲線的批內(nèi)變異系數(shù)為11.87%,均勻批間變異系數(shù)為8.017%。樹立ELISA試劑盒標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性方程為y=1.8061-0.4932x(線性規(guī)模25~2500ng/ml),其LOD為8.11ng/ml,低于劃定的牛奶中鏈霉素zui低殘留定量200ng/ml。但是不標(biāo)準(zhǔn)用藥會(huì)引起畜禽商品尤其是泌乳動(dòng)物乳汁中的藥物殘留,對(duì)人類的健康構(gòu)成埋伏損害。
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